產(chǎn)品介紹

Polyplus通用型DNA/siRNA轉(zhuǎn)染試劑jetPRIME®(101000046)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

jetPRIME®是一種功能強(qiáng)大、用途廣泛的DNA和siRNA轉(zhuǎn)染試劑，用于日常實(shí)驗(yàn)，可產(chǎn)生高效可靠的科學(xué)結(jié)果。jetPRIME®可確保在各種粘附細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)高DNA轉(zhuǎn)染效率和優(yōu)異的基因沉默。jetPRIME®也是DNA/siRNA共轉(zhuǎn)染或幾種質(zhì)粒共遞送的理想選擇。此外，Polyplus的jetPRIME®試劑對(duì)細(xì)胞非常溫和，因?yàn)樗谵D(zhuǎn)染過程中需要少量的試劑和核酸。

一、 的轉(zhuǎn)染效率

jetPRIME®是一種用于日常實(shí)驗(yàn)的強(qiáng)大轉(zhuǎn)染試劑。它導(dǎo)致不同來源的轉(zhuǎn)染粘附細(xì)胞系以及原代細(xì)胞的比例異常高。對(duì)于幾種常用的細(xì)胞系，與 競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手的試劑相比，jetPRIME®試劑獲得了70%至90%的優(yōu)異轉(zhuǎn)染效率（圖1和圖2）。

圖1 jetPRIME與其主要競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手的轉(zhuǎn)染效率比較。在24孔板中轉(zhuǎn)染后24小時(shí)，通過FACS分析在各種細(xì)胞系中評(píng)估轉(zhuǎn)染效率。根據(jù)制造商對(duì)Lipofectamine®2000和jetPRIME®的建議使用條件。

圖2:jetPRIME®與Lipofectamine®3000的轉(zhuǎn)染效率比較。在96孔板或24孔板中轉(zhuǎn)染后24小時(shí)，通過FACS分析在各種細(xì)胞系中評(píng)估轉(zhuǎn)染效率。根據(jù)制造商對(duì)lipofectamine®3000和jetPRIME®的建議使用條件。

二、成本效益：更少的DNA和更少的試劑

jetPRIME®是一種高效的體外轉(zhuǎn)染試劑，需要少量試劑和質(zhì)粒DNA，使用成本效益非常高（表1）。

表1 推薦使用條件。根據(jù)制造商的建議，用于轉(zhuǎn)染的6孔板中每個(gè)孔的DNA和試劑（jetPRIME®和競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手）的量。

除了降低成本外，使用更少的DNA還可以 限度地減少轉(zhuǎn)染引發(fā)的不良細(xì)胞毒性作用。因此，jetPRIME®是高轉(zhuǎn)染效率和優(yōu)異細(xì)胞活力的 試劑。

三、更好的細(xì)胞活力

jetPRIME®在轉(zhuǎn)染過程中對(duì)細(xì)胞極為溫和，可提高細(xì)胞活力并改善轉(zhuǎn)染結(jié)果。用jetPRIME®轉(zhuǎn)染的細(xì)胞是健康的，而用競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手觀察到主要的細(xì)胞毒性（圖3）。

圖3 轉(zhuǎn)染后24小時(shí)細(xì)胞活力。根據(jù)制造商對(duì)每種試劑的建議進(jìn)行轉(zhuǎn)染后24小時(shí)HeLa細(xì)胞的相位對(duì)比顯微鏡檢查。

四、易于使用的protocol

jetPRIME®是一種易于使用的轉(zhuǎn)染試劑（圖4）：

快速方便地放大和縮?。?

與血清和抗生素兼容。

圖4 jetPRIME® protocol。DNA、siRNA以及DNA和siRNA共轉(zhuǎn)染的方便方案。

產(chǎn)品應(yīng)用：

一、質(zhì)粒轉(zhuǎn)染

jetPRIME®可導(dǎo)致不同來源的轉(zhuǎn)染粘附細(xì)胞系以及原代細(xì)胞的百分比顯著較高（表1）。

表1 使用jetPRIME®的各種細(xì)胞類型的轉(zhuǎn)染效率。轉(zhuǎn)染后24小時(shí)通過FACS分析測(cè)定GFP陽性細(xì)胞的百分比。

質(zhì)粒是常見于細(xì)菌中的環(huán)狀DNA小分子。質(zhì)粒與染色體DNA分開存在和復(fù)制，在細(xì)菌中，質(zhì)粒通常攜帶有利于細(xì)菌生存的基因。質(zhì)粒可以被有意地引入所需的細(xì)胞中，并用于在特定細(xì)胞系中過表達(dá)感興趣的基因。這種過程被稱為DNA轉(zhuǎn)染，是研究感興趣的基因功能或蛋白質(zhì)的常用方法。

二、基因組編輯

CRISPR/Cas9系統(tǒng)在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的使用最近已經(jīng)成為在特定基因座修飾細(xì)胞基因組的一種非常方便的方法。它涉及將（a）編碼Cas9的一個(gè)或多個(gè)質(zhì)粒、特異性gRNA和最終要插入的序列，或（b）一個(gè)或兩個(gè)質(zhì)粒和RNA分子（gRNA）的混合物瞬時(shí)轉(zhuǎn)染到哺乳動(dòng)物細(xì)胞中。

三、siRNA轉(zhuǎn)染

jetPRIME®可使多種細(xì)胞系的內(nèi)源性基因表達(dá)降低90%以上。例如，jetPRIME®介導(dǎo)的用靶向HeLa細(xì)胞中內(nèi)源性層粘連蛋白A/C的10nM siRNA雙鏈體轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞，將層粘連蛋白/C基因表達(dá)顯著降低到幾乎無法檢測(cè)的水平（圖1）。

圖1  使用jetPRIME®的內(nèi)源性層粘連蛋白A/C沉默。用10nM的21-mer層粘連蛋白A/C siRNA轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞。48小時(shí)后，使用抗層粘連蛋白A/C的抗體通過免疫熒光顯微鏡評(píng)估層粘連蛋白/C沉默。

四、不同核酸的共轉(zhuǎn)染

jetPRIME®非常適合DNA和siRNA/miRNA共轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)或幾種DNA質(zhì)粒的共遞送。

Polyplus用jetPRIME®進(jìn)行了DNA和siRNA遞送，并在各種毒性極低的細(xì)胞系中觀察到高效的基因沉默。使用10nM的siRNA，在貼壁細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)了超過90%的沉默（圖2）。

圖2 使用jetPRIME®進(jìn)行DNA和siRNA共轉(zhuǎn)染后，幾種細(xì)胞系中的外源性螢光素酶沉默。在6孔板中用每孔400ng p4CMV Luc和10nM熒光素酶siRNA進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：

 ★  高DNA轉(zhuǎn)染效率；

 ★  核酸含量低；

 ★  優(yōu)越的細(xì)胞活力；

 ★  一種用于DNA和/或siRNA轉(zhuǎn)染的試劑；

 ★  性價(jià)比高。

產(chǎn)品訂購(gòu)：

貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	緩沖液量
101000027	jetPRIME® 0.1 mL	5 ml
101000015	jetPRIME® 0.75 mL	60 ml
101000046	jetPRIME® 1.5 mL	2 x 60 ml
101000001	jetPRIME® 5 x 1.5 mL	10 x 60 ml
201000003	x	jetPRIME® buffer 60 ml